Petaka®G3 LOT 用于锚定依赖性细胞(附着的活细胞),用于生理细胞培养和活细胞运输,无需冷冻保存。 | Petaka®G3 HOT 用于锚定依赖性细胞(附着的活细胞),用于某些需要更高氧气交换的细胞类型的生理细胞培养 | Petaka®G3 FLAT 用于 Anchorage Independent Cells(悬浮活细胞),用于生理细胞培养和活细胞运输,无需冷冻保存 |
规格:25个,300个 | 规格:25个,300个 | 规格:25个,300个 |
用于锚定依赖性细胞(贴壁活细胞)的Petaka®G3 LOT 自我调节、独立的细胞培养生物反应器,可控制氧气、二氧化碳、pH 值和蒸发,无需手套箱、三气培养箱或气罐。 Petaka®G3 LOT 可在环境温度下保持培养基环境稳定,并使细胞长时间存活。 非常适合生理细胞培养和运输无需冷冻保存的贴壁细胞。 | Petaka®G3 HOT用于贴壁依赖性细胞(贴壁活细胞) 自我调节、独立的细胞培养生物反应器,可控制氧气(具有更高的氧气交换)、CO2、pH 和蒸发,无需手套箱、三气培养箱或气体罐。 Petaka®G3 HOT 可在环境温度下保持培养基环境稳定,适用于某些具有较高生理耗氧量的细胞类型。 非常适合需要更高氧气交换的某些贴壁细胞类型的生理细胞培养。 | Petaka®G3 FLAT用于悬浮活细胞( Anchorage Independent Cells) 自我调节、独立的细胞培养生物反应器,可控制氧气、二氧化碳、pH 值和蒸发,无需手套箱、三气培养箱或气罐。 Petaka®G3 FLAT 可在环境温度下保持培养基环境稳定,并使细胞长时间存活。 非常适合生理细胞培养和非贴壁细胞的运输,无需冷冻保存。 |
氧气浓度: Physioxia Within(室内低至 2% O2,室外低至 21% O2) 在正常大气(21% 氧气)中孵育的Petaka(缺氧室)在培养细胞的培养基中提供逐渐降低的溶解氧 (DO) 浓度,始终在活组织细胞的生理极限(Physioxia)内(图 1)。 细胞培养以相当于动脉血浓度(氧分压 75 mmHg)的 DO 浓度开始,该浓度足以促进指数细胞生长。随着细胞增殖,浓度自动降低到接近细胞在正常活哺乳动物组织和胚胎发育中接受的水平的溶解氧浓度,其中 PO2 接近 15 mmHg(参见参考资料),避免细胞因 ROS 形成而受损并促进细胞分化。 毫无疑问,培养的细胞需要氧气,但不能过量。当细胞在培养基中培养时,在烧瓶和培养皿等经典细胞培养设备中,细胞会暴露在过量浓度的 DO 中。开放大气中含有约 20% 的氧气。因此,空气中的氧气溶解在培养基中直至其在水中的溶解度达到极限,具体取决于细胞培养温度、大气压力和培养基的盐度,导致 DO 浓度对于正常情况而言过高整合活组织的细胞。这是一个伪影,它可能是许多误导性结果和实验设置与体内设置之间差异的来源。 CelartiaTM 细胞培养系统将培养基中溶解氧的分压自动平衡为 25 mmHg,再现自然环境中的细胞呼吸和生长条件,就像在生物体内一样。因此,PetakaTM 生物反应器被设计为使用独特的微管气体扩散通道系统提供具有生理呼吸的半封闭细胞室。有了这个系统,细胞环境中的氧气阈值被维持在生理水平,类似于生物的自然身体,为干细胞和所有其他哺乳动物细胞类型创造了一个完美的环境。能够在含 21% 氧气的培养箱中培养细胞,Celartia 的细胞培养系统根据细胞类型和汇合程度,在某些特定条件下将氧气降至 5% 甚至高达 2%,从而避免使用缺氧室或三气体培养箱。这些体外“常氧”条件在市场上的任何其他生物反应器中从未有过。 Petaka LOT 平均 DO = 1 mg/L(0.5 至 1.1 mg/L,取决于细胞类型),相当于组织中的平均 22.7 mmHg (Torr) 或相当于缺氧室中的平均 3.11 %O2。 Petaka HOT 平均 DO = 3 mg/L(2.8 至 3.2 mg/L,取决于细胞类型),相当于组织中的 66.5 mmHg 或相当于缺氧室中的 9.33 %O2。 | ||
PetakaG3 2% 氧气(用于细胞培养的自主 Physioxia 室) Celartia 推出了世界上具有生理性的缺氧室 Petaka G3,它尽可能地模拟了生物体中的组织细胞如何暴露于氧气供应不足的情况。 在 Celartia 的缺氧室内,细胞暴露于氧气供应逐渐减少的环境中,从 45 毫米汞柱降至活体脊椎动物记录和公布的最低氧气张力:13.32 毫米汞柱。 Celartia 的缺氧室 Petaka G3 是完全自主的。 没有缺氧干扰 Celartia 的缺氧室允许在工作台上和开放的常规大气中使用: 1. 连续测量介质中的氧气储备。 2. 永久评估每个细胞和时间的细胞耗氧量。 3. 暴露于强子束、电子束和电磁辐射的细胞培养维持缺氧水平。 4. Celartia 的缺氧室是封闭的并高度防止污染 5. 无限次的培养基更换、取样和向培养基中添加特殊物质(和研究药物)是在常规层流罩中进行的。 6. 实验室工作台 使用普通显微镜进行显微镜观察和延时录像,无需手套箱或任何其他环境控制设备 7. 可以在任何类型的温度控制设备中培养,例如普通培养箱、CO2 培养箱、加热块甚至水浴. 8. Celartia 的缺氧室可以堆叠成阵列,具有高效的空间和能量管理 。 9. Celartia 的缺氧室是一次性的。 科学界一致认为,哺乳动物组织缺氧是红细胞不能有效替代组织细胞消耗的间质介质中的氧气时产生的进行性发作状态。这正是 Celartia 的缺氧室调节缺氧水平的方式:与活细胞密切相互作用。设备中包含的专有微通道呼吸系统可控制氧气交换,根据培养细胞的类型和数量稳定最低水平。 发现对缺氧的应激反应,特别是通过缺氧诱导因子 (HIF) 和侧枝细胞的细胞反应,开辟了细胞生物学研究的广阔领域。因此,新技术被应用于产生可以在有限氧气可用性下培养细胞的环境。 工业上使用的直接程序是生产填充和/或吹扫所需气体混合物的密封箱(缺氧室)。在这些盒子内,安装了传统的细胞培养设备(烧瓶、袋子和培养皿),整个组件需要放入培养箱中以达到所需的温度。 这种层叠排列意味着许多困难: 1. 限制进入细胞培养装置会损害: a. 文化观察 B. 媒体变化 C. 向媒体添加补充 2. 气体成分不稳定,由于: a. 许多需要的细胞培养管理操作需要打开盒子。 b. 在几分钟内从常氧到缺氧的创伤步骤 c。细胞内的气体减压作用 d.不受控制的气体通过箱体材料扩散和维护要求 3.缺氧仅限于阶段性。没有从常氧到缺氧的连续转变。 4. 空间(体积)浪费过大 5. 要求气罐作为组件的一部分 只有少数可用的高度复杂的手套箱包括一个控制单元程序,该程序允许在培养细胞培养设备的腔室中逐渐缺氧;然而,这些复杂的设备体积庞大,需要大量的用户培训,耗时,需要巨大的气罐、大量的电源和实验室空间。 Petaka G3 低氧室技术克服了所有这些限制和限制。 杰出的是,Celartia 的 Petaka G3 缺氧室在开放大气中实现了这一点,在一个普通的培养箱内,没有辅助气罐、电子传感器、反馈电子设备或电源。 Celartia 的低氧室操作比普通多孔板更容易,不需要特殊培训即可以z高效率使用它们。 深度缺氧实验 Petaka 为研究人员提供了完全的样品操作自由,即使在非常低的氧气缺氧条件下,也不会随时破坏缺氧环境。 Petaka 包装在真空聚酯薄膜袋中时,它不允许培养环境中的氧气通过,细胞会在数小时内消耗培养基溶解的氧气,从而造成深度缺氧条件。细胞可以在这些条件下生长和孵育,最终通过将端口直接穿过聚酯薄膜袋来取出细胞培养物的样本,避免暴露于更高的氧气浓度。 为了研究缺氧或含氧量正常条件下的细胞行为,实验室使用受控环境培养箱和手套箱,它们提供了在低于环境 O2 浓度的条件下工作的可能性。 手套箱使研究人员能够在不影响腔室气体控制环境的情况下培养或执行样品操作。然而,Petaka 不需要特殊的培养箱、手套箱或任何气罐。 | ||
无需 CO2 培养箱 基于 Earle 盐的培养基使用碳酸氢盐/碳酸系统进行缓冲。这些缓冲液依赖于碳酸的生理相关 pKa 以及气态和介质溶解的二氧化碳的平衡,以维持 5% 至 10% CO2 培养箱中的 pH 值。 Petaka 的设计无需额外的二氧化碳环境。因此不需要 CO2 培养箱,避免了对 CO2 气瓶的需要。细胞培养产生的二氧化碳也受到控制。这是通过集成到设备中的气体转移淬火系统 (GTQS) 实现的。因此,Petaka 内的 CO2 水平得以维持,从而使 pH 值保持在与 15 至 3000 万个细胞的生长相适应的水平。 因此,Petaka可以在没有CO2调节的普通培养箱中孵育,细胞在封闭稳定的环境中生长直至自身新陈代谢的极限。这些产量将根据每个单独的细胞代谢而变化。我们建议在 Petaka 培养细胞系时进行培养测试和适应期。 | 不需要加湿器 Petaka 实际上是气密性的,因此不需要湿度饱和的培养箱。 您可以储存预填充的 Petakas,准备好宿主细胞,并准备好立即使用。冷藏保存时间不受脱水限制。 消除培养箱、水盘和水雾中的饱和湿度,降低培养箱中交叉污染的风险。 在 Petaka 中,集成的微通道系统 (MFS) 保护内部环境,避免不必要的水分蒸发。37ºC 下的脱水已降至最低,允许在 RH 10% 下培养 30 天,最终培养基脱水低于 10%。 | |||
高度防污染 微生物污染是细胞培养中的一个严重问题。培养物中微生物感染的典型途径是环境空气,当烧瓶从通风橱转移到培养箱时,水浴,以及 为许多细菌菌株提供理想生长条件的 CO 2培养箱的潮湿环境。 细胞培养感染的其他途径包括:在进行细胞培养操作时接触非无菌表面、材料和工作台面上的溢出物、移液或倾倒细胞悬浮液和微观气溶胶的溅回。 Petaka 是一个几乎完全密封的系统。空气只能通过 0.2 微米孔径的过滤器进入。盖子和盖子都不用于接触液体。Petaka 通过一个硅胶端口注入,该端口在移除注射头后密封。 对注射尖端和硅端口进行消毒可z大限度地减少污染的机会。此外,Petaka 在端口和培养室之间有一个 80 mm 的扩散屏障。这以指数方式降低了微生物在长时间孵育期间通过端口狭缝进展的机会。 | 体外细胞休眠或暂停 使用普通烧瓶,当细胞达到汇合的单层状态或使载体饱和时,应尽快进行传代培养。 使用 Petaka,生长的细胞培养物可以在室温下长期存活,没有脱水风险。这有助于细胞培养管理和日常维护;并为细胞生物学和毒理学研究提供额外的优势(有关条件和方法,请参见“Petaka 快速方案”,例如方案 4 和 8 –“在体外休眠中保持细胞”)。 当细胞处于缓慢的细胞周期时,将培养物从 37° C 转移到 22° C 有利于休眠状态的细胞保护。这是在 80% 汇合状态下实现的。 在低温和低 pH 值下,细胞将 DNA 复制几乎减少到零,并保持类似 假死的状态(可以预期细胞在 G2 期有一定的积累)。休眠期的持续时间取决于细胞类型. 大多数细胞至少可以存活 7 天,而其他细胞则可以存活超过 200 天。 | |||
通过 Petaka 离心分离细胞和上清液 Petaka G3 通过在单个设备中执行两种功能(细胞生长和细胞浓缩)来简化操作。使用 Petaka 转子对 Petaka 进行离心,可以将细胞集中在培养基通道的一角,从而用最少的培养基促进细胞回收。或者将细胞集中在对角,从而避免细胞沉淀的培养基收获。因此,细胞培养变得更简单、更快和更通用。 | 细胞运输和物流 细胞运输/运输。使用 Petaka,您可以在正常环境温度下长距离运输活细胞。对于大多数细胞系,PetakaG3 不需要干冰或冷藏即可将活细胞运输 1 至 14 天。 其纤细的外形便于包装和保护。特别设计的邮寄袋非常适合运送一个或两个单位。 Petaka 体内的细胞在正常温度下会保持休眠状态数天,甚至数周。生存能力逐渐降低,具体取决于细胞类型。例如,CHO-K1 细胞可以移动 3 到 4 周,保持 75% 的活力。一些肿瘤细胞可以移动一个月或更长时间。 | |||
微重力和 3D 细胞培养 Petaka™ G3 细胞培养装置/生物反应器可用于培养细胞聚集体,从任何类型的分化细胞或干细胞形成假组织。这些聚集体,可以植入生物体内进行再生研究、癌症研究和再生疗法实验。形成 3D 结构的分化细胞和肿瘤细胞提供了有关真实组织中细胞行为的重要实验信息。Petaka™ G3 细胞培养装置/生物反应器可用于培养由任何类型的分化细胞或干细胞形成假组织的细胞聚集体。这些聚集体,可以植入生物体内进行再生研究、癌症研究和再生疗法实验。形成 3D 结构的分化细胞和肿瘤细胞提供了关于真实组织中细胞行为的重要实验信息。微重力 3D 培养物可以在 Petaka™ 生物反应器中获得,当它受到受控和适应性旋转时,将细胞保持在诱导形成的微重力条件下3D 细胞团(伪组织)。 囊性 3D 细胞培养
该系统适用于通过可溶性介质研究细胞间相互作用,使用简单而独特的生物反应器 Petaka G3。从概念上讲,该生物反应器允许: 1) 一种以上细胞类型的生长,被充满介质的间隙隔开。 2) 数百万个细胞的生长,让重复的细胞取样操作不中断培养。 3) 对共培养中包含的不同细胞类型进行单独采样。 4) 不间断培养的重复培养基更新和取样操作。 这一概念的生物产品是“囊性 3D 细胞培养物”,它在单个体积中提供至少三个独立的细胞片,有或没有基质,生长具有明确的边界,周围有 15 至 25 个囊袋(囊肿)共享媒体的 mL(见上图)。该系统是一个立方体结构,有 6 个面或 3 对相对的墙彼此面对。在这个系统中,中央腔或囊肿接收周围细胞分泌或释放的所有物质,包括代谢物、细胞外细胞器、外泌体、脱落的微泡、凋亡小泡等。细胞粪便附着在壁上,未涂覆或涂覆有特定的单分子基质,如层粘连蛋白、玻连蛋白、胶原蛋白等,或分子混合物,如 Matrigel 或其他,所有这些都有利于细胞通过整合素附着。 形成细胞壁的细胞释放的可溶性分泌物和颗粒元素随机循环通过囊肿介质,如囊胚、卵泡等。那些悬浮的元素与由受控温度梯度产生的柔软而缓慢的对流拖曳的其他壁细胞接触。许多生理反应由可溶性分子和颗粒元素控制,例如从活细胞释放的外泌体 细胞的底侧层优选受颗粒元素的影响,它通过重力沉降接收所有由上层细胞释放的密度大于1的元素;如果该装置受到方便的离心,当暴露于倍增的 g 力矢量时,这种影响对生活在囊肿一侧的所有细胞更加强烈。 通过准确控制缺氧、接近生理 DO(约 2 ppm)、CO2 控制和脱水控制(Petaka G3 条件),这些培养物可以进化超过 2 周,从而允许长期的细胞间相互作用。囊肿培养系统(Petaka G3 设备)允许分别释放所有细胞或每种细胞类型的样本的游离酶细胞,因此独立地对每一侧进行取样以进行显微镜、FACS、PCR 或生物化学分析 |