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自动化兼容 – 安全处理 – 无表面附着
世界著名且独特的Akura™ PLUS 悬滴系统 采用 96 孔格式,具有自动化兼容的顶部加载功能。
通过独特的 SureDrop™ 入口从顶部加载细胞悬浮液,该入口专为高度均匀和稳定的悬滴而设计
在长期培养中重力辅助形成均匀的球体/类器官形态和功能,导致每孔一个球体
适用于多种细胞类型,包括通常不会在超低附着表面上形成球体或类器官的细胞
悬滴系统包含10个Akura™ PLUS 悬滴板和10个Akura™ 96 球体板,单独包装,由聚苯乙烯和环烯烃聚合物制成,无菌,并包括盖子。
建筑学
ANSI/SLAS 96 孔标准格式,与自动液体处理系统完全兼容
SureDrop™ 进样口技术能够在无支架条件下在重力辅助下形成均匀的球体,从而每孔形成一个球体/类器官
Akura™ PLUS 球体悬滴系统由两块板系统组成:一块 Akura™ PLUS 悬滴板和一块 Akura™ 96 球体微孔板
处理
顶部装载用自动多通道移液取代了手动滴液分配和板的上下翻转
自由漂浮的球体完全可接触,可以转移到 Akura™ 96 球体板进行长期培养或分析
问:GravityPLUS 悬滴系统与 Akura™ PLUS 球体悬滴系统相同吗?
答:是的,两个系统是相同的。我们只是更改了名称,因为我们最近通过其他产品(例如 Akura™ 384 球体微孔板)扩展了 InSphero 微孔板产品组合,因此决定将所有孔板置于新的系列品牌名称 Akura TM下。
问:您能为我的细胞悬浮液推荐一个用于生成球体的细胞浓度吗?
答:对于长期生长分析,我们建议从低细胞数量开始(每滴 40 µl 250 – 500 个细胞)。如果需要使用非增殖细胞或快速生产较大的球体,请从更高的数量开始(每 40 µl 2500+ 个细胞)。
一般来说,我们建议在使用新细胞类型时尝试不同的浓度来定义z+范围。
问:SureDrop™ 进样口是什么?
答:InSphero 的 Akura™ PLUS 悬滴板采用正在申请的 SureDrop™ 微技术,可精确分配到悬滴中并吸出悬滴。由于液滴体积与接种细胞数相对应,Akura™ PLUS 悬滴板中产生的球体表现出出色的尺寸一致性,整个 96 孔板的直径变化为 5% 或更小。
为了确保 SureDrop™ 密封,移液器吸头与孔表面充分接触非常重要,以确保完整的液体转移和均匀的液滴形成。弹簧加载孔的弹性可调节,以确保在移液过程中施加向下压力时保持接触。
问:Akura™ PLUS 悬滴板中每滴的z+体积是多少?
答:为了获得z+且稳定的悬滴,请将 40 µl(移液速度 < 50 µl/秒)细胞悬浮液轻轻注入 Akura™ PLUS 悬滴板的每个孔中。重要提示:为了生成尺寸和细胞组成均一的球体,必须在接种到 Akura™ PLUS 悬滴板之前轻轻地上下移液,以确保细胞均匀分布。
问:为什么建议在球体转移之前预润湿 Akura™ 96 板孔?
答:转移前需要预润湿 Akura™ 96 板的孔,以防止混入气泡。为此,将吸头深入孔中,向每个孔中加入 40 µl 聚集介质。将吸头放在孔上腔的凸缘处,除去预润湿溶液。吸出培养基直至完全从每个孔中除去。室底部可能残留微不足道的量(< 5-7 µl)。
问:如何将球体转移到接收器 (Akura™ 96) 板上?
答:将带有 Akura™ PLUS 板条纹的框架放置在 Akura™ 96 板上,将三个销钉插入 Akura™ 96 板顶面相应的孔中。Akura™ PLUS 板下方的液滴将与下方 Akura™ 96 板的孔完美对齐。
使用慢移液速度(≤ 10 µl /秒),通过 Akura™ PLUS 悬滴板孔的入口添加 70 µl 培养基或缓冲液。确保移液器尖端与孔入口紧密接触。
问:防止板外孔蒸发的z+方法是什么?
答:孔的外排(周边)蒸发是大多数小容量培养平台的常见现象,因此需要仔细注意以保持适当的湿度控制。悬滴(Akura™ PLUS 板)或 Akura™ 96 板的孔中的外排蒸发虽然在遵循以下建议时不常见,但仍有可能发生。
如果不加以控制,明显的蒸发可能会导致培养基成分(例如血清、盐)浓缩或沉淀,从而影响球体的形成或健康,并可能在很长一段时间内改变培养基中化合物/添加剂的有效浓度。期限实验。
为了在使用 Akura™ PLUS 悬滴系统时提供z大程度的湿度控制,我们建议采取以下措施:
使用湿度控制良好的培养箱(> 95% 的相对湿度),并采用实践来维持和尽量减少湿度损失(例如,尽量减少培养箱门的打开和关闭)。
在 Akura™ PLUS 悬滴板中形成微组织期间,始终使用底板中提供的加湿器垫,用无菌 0.5 倍稀释的 PBS 彻底浸泡。这是在悬滴中微组织成熟期间保持 Akura™ PLUS 板中适当湿度的关键。
对于湿度控制较差的培养箱,可在加湿垫上涂抹低渗缓冲溶液(例如0.2×PBS)。
对于 Akura™ 96 板中的培养,建议每孔至少添加 50-70 µl 培养基,如果培养箱湿度控制是一个持续存在的问题,则可增加至最大 80 µl。如果条件允许,中等交换频率也可以增加到每隔一天或每天。
在使用低频介质交换进行长期研究时,我们建议使用 InSphero Incubox来减少边缘效应。